Wykorzystując technologię mikropęcherzyków BACS™, zestaw do selekcji, aktywacji i ekspansji ludzkich limfocytów T został zaprojektowany w celu delikatnej izolacji wysoce czystych limfocytów T i ich aktywacji do wykorzystania w terapii komórkowej. W tym procesie pozytywnej selekcji komórki T są izolowane, aktywowane i ekspandowane przy użyciu mikropęcherzyków selekcji, aktywacji i ekspansji Akadeum w połączeniu z koktajlem przeciwciał skierowanych przeciwko CD3 i CD28. Ten wysoce skalowalny proces pozwala uzyskać dużą liczbę aktywowanych i transdukowalnych komórek potrzebnych do wspierania badań i rozwoju procesów w terapiach opartych na komórkach T. Delikatność separacji i aktywacji opartej na flotacji skutkuje mniejszą liczbą wyczerpanych komórek w porównaniu ze starszymi metodami aktywacji - lepsze wyniki badań i rozwoju procesów.
Nowatorskie podejście Akadeum do pozytywnej selekcji do produkcji komórek CAR-T zapewnia ulepszenia w stosunku do obecnych standardowych metod branżowych, a wrodzona skalowalność mikropęcherzyków BACS™ pozwala na szybką optymalizację procesów terapii komórkowej.
Wykorzystując umyty materiał leukopak lub PBMC jako materiał wyjściowy, komórki T są znakowane biotynylowanymi przeciwciałami ukierunkowanymi na CD3 i CD28. Mikropęcherzyki BACS™ Selection, Activation & Expansion są mieszane z próbką, gdzie wiążą się ze znakowanymi komórkami i delikatnie unoszą je na powierzchnię. Niepożądane komórki można usunąć spod warstwy mikropęcherzyków, a pozytywnie wyselekcjonowane limfocyty T przenieść do naczynia hodowlanego.
BACS™ są z natury obojętne i nie wpływają na warunki hodowli. Wraz z upływem czasu i podziałem komórek, komórki delikatnie osiadają na dnie płytki, gdzie kontynuują ekspansję aż do momentu pobrania.
Przejdź od skali badawczej do komercjalizacji dzięki mikropęcherzykom. Wystarczy użyć więcej lub mniej, aby dostosować je do potrzeb badawczych i utrzymać wydajność.
Zestaw do selekcji, aktywacji i ekspansji ludzkich limfocytów T jest idealny do badań poprzez rozwój procesu, z dostępnymi wersjami GMP i Clinical Ready, aby wspierać procesy przedkliniczne do komercjalizacji terapii komórkowej.
Optymalizacja wyników przy jednoczesnym zminimalizowaniu potencjalnego stresu lub uszkodzenia komórek.
2 x 108 PBMC wykorzystano jako materiał wyjściowy do selekcji, aktywacji i ekspansji ludzkich limfocytów T Akadeum. Po selekcji, 5 x 106 komórek T/dołek wysiano i hodowano w płytkach G-Rex® 6M (Wilson Wolf Manufacturing). Cząsteczki magnetyczne (zgodnie z protokołem zalecanym przez producenta) zostały użyte do selekcji porównawczej komórek T i zostały wysiane podobnie w ilości 5 x 106 na dołek. Komórki do studzienek kontrolnych zostały wyizolowane za pomocą zestawu Akadeum Human T Cell Leukopak Isolation Kit (selekcja negatywna) i wysiane w ilości 0.5 x 106 na ml w standardowych 24-dołkowych płytkach do hodowli tkankowej. We wszystkich warunkach stosowano kompletne podłoże ExCellerate™ (Bio-Techne), uzupełnione 2% ludzką surowicą (Access Biologicals). Dodatkowe cytokiny IL-2, IL-7 i IL-15 (PeproTech) zostały dodane do dołków z zestawem do selekcji, aktywacji i ekspansji ludzkich komórek T Akadeum, podczas gdy dołki magnetyczne i kontrolne zostały uzupełnione IL-2. Punkty czasowe zbioru dla wszystkich warunków przypadały na dni 4, 7 i 11.